Análises Físico-Químicas do Leite - Avaliação do Leite por Enzimas

A) Objetivo:  Avaliar o quanto foi aquecido o leite , na pasteurização. No leite cru estão presente a fosfatase e a peroxidase . Quando o mesmo é pasteurizado, a  fosfatase alcalina , deve estar ausente e a peroxidase fracamente positiva.

 

Tubos de ensaio

Estante p/ tubos de ensaio

Banho Maria a 37⁰c

Pipeta graduada 10ml

Pipeta graduada 1ml

Kit fosfatase alcalina diasys

 

Preparo do reativo de trabalho: Pipetar 4ml do kit fosfatase  n:1 de tampa branca e colocar em tubo de ensaio e adicionar 1ml do kit fosfatase n:2 de tampa vermelha, misturar  e guardar na geladeira.

Análise: Pipetar para um tubo de ensaio 1ml ou 20 gotas do reativo de trabalho e 0,1ml do leite pasteurizado. Misturar e deixar em repouso por 3 minutos a 37⁰c ou 6 minutos a temperatura ambiente. 

Leite cru e mal pasteurizado: Produzirá p-nitrofenol de cor amarela e o resultado será fosfatase positiva.

Leite pasteurizado: Não produzirá mudança de cor e o resultado será fosfatase ausente.

 

Tubos de ensaio

Estante p/ tubos de ensaio

Conta gotas

Pipeta graduada 10ml

Pipeta graduada 1ml

Guaiacol 1%

Água oxigenada 20 volumes

 

C) Procedimento: Medir 10ml de leite, adicionar pelas paredes do tubo 1ml de guaiacol e pingar 3 gotas de água oxigenada.

Leite cru: Cor róseo salmão 

Leite pasteurizado: Anel róseo salmão 

Leite muito aquecido: Cor branco